脱毒甘薯的生产历程包括优良品种筛选、茎尖苗培育、病毒检测、优良茎尖苗株系评选、高级脱毒试管苗速繁、原原种、原种和良种种薯及种苗的滋生等8个环节每个环节都有严格的要求,更终目的是包管各级种薯的质量,充分发挥脱毒甘薯的增产潜力。 一、优良品种选用 甘薯优良品种许多,并且经过脱毒后都能差别水平地提高产量、改善品质。但甘薯品种都有一定的区域适应性和生产实用性,在进行甘薯脱毒时一定要凭据外地区气候、土壤和栽培条件,选用适合外地区大面积栽培的高产优质品种或具有特殊用途的品种。例如,在城郊地区更好选用龙九、北京553、徐薯34、心香、西农431等食用型品种,甘薯"淀粉"加工区应选用SL-19、鄂薯6、豫薯12、豫薯13,徐薯22号等淀粉用品种。另外,特别需要注意的是,甘薯脱毒后只能去除体内某些或某种病毒,其品种自己的抗病毒、抗茎线虫病、抗根腐病等病虫害能力并没有太大改变。选用品种时,一定要考虑到品种自己的抗病虫特性。 二、茎尖苗培育 病毒主要通过维管输导组织流传,茎尖分生组织未形成维管制,病毒主要通过细胞间连丝扩散,流传速度很慢。再者,茎尖分生组织新陈代谢运动十分旺盛,生长激素浓度较高,病毒的复制受到很大抑制,因此,茎尖顶部分生组织不带或很少携带病毒。在无菌条件下切取甘薯茎尖分生组织,在特定的培养基上进行离体培养,就能够再生出可能不带有病毒的茎尖脱毒苗。诱导茎尖苗的要领:选甘薯苗茎顶部3厘米长的芽段,用70%酒精、3%漂白粉液划分消毒,在超净事情台内解剖镜下剥离茎尖。将剥离的长0.2-0.5毫米(一般带1-2个叶原基)的茎尖接种在附加1-2毫克每升6-BA的MS培养基上,26-28摄氏度下光培养,茎尖膨大变绿后转入无激素的MS培养基上培养成茎尖试管苗。待苗长至5-6片叶时移至营养钵内进行病毒检测。一般来讲,从剥茎尖到诱导出5-7片叶的茎尖苗至少要用60-90天。利用分生组织培养诱导甘薯茎尖苗是甘薯脱毒的技术要害。 三、病毒检测 茎尖分生组织培养获得的茎尖苗并不都是脱毒苗,只有部分苗不含病毒,是脱毒苗;茎尖苗必须经过严格的病毒检测确认不带病毒后厂才是脱毒茎尖苗。茎尖苗的检测十般首先接纳目测法淘汰弱苗和显症苗,然后再用血清学要领或分子生物学要领进行筛选。经血清学或分子生物学要领检测呈阴性的样品再进行指示植物嫁接检测。 四、优良株系评选 甘薯的芽变率比较高,茎尖分生组织培养再生的茎尖苗株系间在形态和产量方面往往保存较大差别。因此,经病毒检测确认的脱毒苗必须进行优良株系评选,淘汰变异株系,保存优良株系。株系评选的要领是:将脱毒苗株系每系5-10株栽种到防虫网室内,以同品种普通带毒薯为比照,进行形态、长势、产量等多方面的视察评定,选出若干既切合品种特性又高产的更优株系,混淆滋生。 五、高级脱毒试管苗速繁 利用茎尖分生组织培养获得脱毒苗后,要获得大田生产利用的足够脱毒苗,快速滋生技术起着决定性作用。脱毒甘薯茎尖苗的大宗滋生,可以接纳试管苗单叶节快繁或温网棚滋生2种方法来完成。二者在速度、本钱等方面互有优势。 1、 脱毒苗试管快繁 脱毒苗试管快繁具有以下优越性:①滋生速度快。在合适的培养条件下(温度25~28摄氏度,每天光照16小时),1个茎节45天内即可长成具5-6片叶的小植株,以继代1次增殖5株盘算,其滋生系数为5n。②制止病毒再侵染。脱毒苗的试管快繁是在严格的无菌条件下进行的,即没有病毒源也没有流传媒介。③继代滋生成活率高。除少少数由于操作失慎造成试管苗污染外,单茎叶成苗率达100%。④不受季节、气候和空间限制,可以进行工厂化生产。目前脱毒苗快繁要领为固体培养,茎尖苗试管快繁培养基:一般接纳不加任何激素的1/2培养基。 试验标明,全量MS培养基能够给试管苗提供较充分的营养身分,从而能够坚持试管苗较旺盛的生长活是理想的培养基;但从试繁的角度看,在包管正常情况下,滋生系数的崎岖主要取决于叶片数及株高2个指标,l/2MS培养基中试管苗的生长虽缺乏全量MS培养基中的旺盛,但上述2个指标仍能抵达快繁的要求,也为较理想的培养基。 2、MS的配制及培养基的配制要领 MS的配制分为大宗元素、中微量元素、有机物类和铁元四种药剂,其配方为: 大宗元素MS1:20倍
元素 | 化学式 | 配量《mg》 | 2L用量(mg) | 硝酸铵 |
| 1650*20=33000 | 66000 | 硝酸钾 |
| 1900*20=38000 | 76000 | 二水氯化钙 无水氯化钙 |
| 440*20=8800 332.25*20=6645 | 17600 13290 | 七水硫酸镁 |
| 370*20=7400 | 14800 | 磷酸二氢钾 |
| 170*20=3400 | 6800 |
定容1000ml 取量50ml/L 中量元素MS2:100倍
元素 | 化学式 | 配量《mg》 | 备注 | 硼酸 |
| 6.2*100=620 |
| 四水硫酸锰 |
| 22.3*100=2230 |
| 七水硫酸锌 |
| 8.6*100=860 |
| 二水钼酸钠 |
| 0.25*100=25 |
| 碘化钾 | KI | 0.83*100=83 |
| 氯化钴 | CoCL2.6H2O | 0.025 | 由于用量小欠好称重,故扩大1000倍称重,定容500ML,含量0.05mg/ml,取50ML | 硫酸铜 | CuSO4.5H2O | 0.025 |
定容1000ml 取10ml/l
MS3 100倍
元素 | 化学式 | 配量《mg》 | 七水硫酸铁 | FeSO4.7H2O | 27.8*100=2780 | 乙二胺四乙酸二钠 | EDTA | 37.3*100=3730 | 定容1000ML 取10ml/L (定容后需加热至欢喜)
MS4 100倍
元素 | 化学式 | 配量《mg》 | B1 |
| 0.4*100=40 | B6 |
| 0.5*100=50 | 烟酸 |
| 0.5*100=50 | 甘氨酸 |
| 2.0*100=200 | 定容1000ml 取10ml/L 将配好的MS定容后装入玻璃容量瓶中放冰箱中存放,待用。 培养基配制办法:(配制1L) 1、取各ms混淆+30g白砂糖溶解 2、调PH至5.8,偏碱用HCl,偏酸用NaoH.(1摩尔盐酸:100ml蒸馏水加8.6mlHCL;1摩尔氢氧化钠:100ml蒸馏水加4gNaOH)。 3、将加水约500ml的不锈钢锅加热至沸后,加6g琼脂粉的水溶液,不绝搅拌至欢喜。 4、将PH值调好的ms+白砂糖的溶液加入煮沸的琼脂溶液中,停止加热,加水定容1L,并不绝的搅拌至培养基均匀。 5、用液体分装器分装到培养瓶中,约50-60ml/瓶。后将无菌封口膜用橡皮筋封好。 6、把封好有培养基的培养瓶加入高温灭菌箱中灭菌。(121摄氏度,灭菌20min) 7、在通过灭菌的培养基上进行无菌甘薯苗的切段(每瓶接种3个茎段)、接种的快繁事情。 3、试管苗快繁的情况 试管苗快繁的光照条件:光照时间是非对甘薯试管苗发育的意义,不但在于茎叶形态发育的需要,并且对其生长也有显著影响。在暗培养条件下,甘薯脱毒苗节段有叶的剖析及茎的伸长,但呈黄化状态,叶片不伸展或生长,茎细弱。甘薯脱毒试管苗的株高、叶片数及鲜重随光照时数的延长而提高,延长光照时数对试管苗茎叶的剖析及生长均为有利,较长的光照有利于提高试管苗滋生系数,获得健壮的脱毒试管苗。另外,在差别的光照时数下,甘薯脱毒试管苗的平均节间长度差别不显著,因为试管苗切段为单叶节快繁,节间无须过长,在一定的节间长度下,叶片数增加,则滋生系数呈几何级数数增加。延长光照时数,陪同株高的增加,只增加叶片数而不显著增加节间长度,正适合于试管苗单叶节快繁的需要。目前在组培室中一般接纳光照强度2000-3600lux,光照16h. 温湿条件:据研究,甘薯试管苗在25-28摄氏度生长做快,空气湿度坚持在75%即可。 将接种好的试管瓶移置于以上情况的组培室进行培养45-60天,待脱毒苗5-6片叶,即可再次进行在试管瓶的扩繁,或移栽至蛭石营养盘驯化。试管苗在蛭石营养盘中的驯化要领为:首先将试管瓶上的无菌封膜去掉炼苗2-3天,再进行移栽,可以提高试管苗的成活率,移栽时将试管苗的根部剪掉,移栽至含水合适的(手握蛭石成团)蛭石盘中,株行距为5*5cm。在光照3600lux,温度25-30摄氏度,空气湿度在75%的情况下培养10天左右,待外界情况合适时,移栽至防虫网棚进行扩繁,若外界情况不适合,还可在组培室中进行蛭石的扩繁。
4、高级脱毒苗田间快繁 ①防蚜塑料大棚速繁。在3月中旬将5-7片叶的脱毒试管苗翻开瓶口,室温下加光照炼苗5-7天。栽前头天下午在棚内苗圃上撤上用100克40%乐果乳油加水2.5-5千克稀释后与15-25千克干饵料拌成的毒饵,以消灭地下害虫。然后按5厘米X5厘米株距栽种在笼罩防虫网的塑料大棚内,浇足水后加盖一层小弓棚,把温度控制在25摄氏度左右。待苗长至15-20厘米时剪下蔓头继续栽种、快繁。接纳这种双膜育苗要领滋生系数可以抵达100倍以上。但要注意小水勤浇,通风透气,包管温度既不可低于10摄氏度,也不可高于30摄氏度。②防蚜网棚速繁。即在4月下旬或5月初将经过锤炼的5-7片叶的脱毒试管苗,按每亩10 000株的密度栽种在防蚜虫大棚内,勤施肥水,待苗长至15厘米左右时摘心,增进分枝。以后待分枝苗长至5片叶时继续剪苗栽种速繁,或直接用于滋生原原种。 ③防蚜冬暖大棚越冬快繁。9月底10月初将脱毒试管苗移栽在外加40目防虫网的冬暖式大棚内。11月上旬盖塑料膜,12月上、中旬加盖草帘子,使棚内温度坚持在10-30摄氏度。注意实时防治蚜虫。到4月中、下旬采苗移至苗圃进射扩繁。这种要领脱毒苗在外袒露时间过长,重新熏染病毒的时机较大,一般用的较少。 需要特别强制的是,甘薯病毒主要靠桃蚜(Myzuspersicae)、棉蚜(Aphisgossipii)和萝卜蚜(Lipaphis erysimi)以非长期方法进行流传。因此,无论接纳何种速繁要领,都要切记接纳隔离步伐(40目防蚜网、500米以内无普通带毒甘薯空间隔离等)和按期喷洒防治蚜虫的药剂来避免蚜虫传毒再侵染。 六、原原种繁育 用高级脱毒试管苗在防蚜虫网棚内无病原土壤上生产的种薯即原原种。脱毒甘薯原原种的繁育要求很是严格:必须具备3个条件:第一,栽种的必须是高级脱毒试管苗。第二;必须要在防虫网棚内生产原原种。防虫网棚是繁育原原种的重要条件之一,并且所用防虫网的网眼必须在40目以上,这样蚜虫就不可通过;可以大大减少蚜虫流传病毒的时机。第三,所用地块必须是无病原土壤,更好选用多年未栽种过甘薯的土壤。另外,还要经常喷洒杀虫药剂,防治蚜虫,以免爆发病毒再侵染。这3个条件是滋生原原种所必须具备的。使用原原种苗甚至原种苗栽种在防虫网棚内所生产的种薯,严格讲不可算是原原种。 原原种滋生在防虫网棚内进行网棚内光照较弱,通风透气性较差,很容易造成旺长。因此,滋生原原种时,栽插密度不易太高,一般以每亩4000株为宜。在治理方面应注意少施氮肥,多施磷、钾肥,注意控温、控水、控湿,既要避免茎叶徒长,又要增进多结薯块。如果脱毒甘薯长势偏旺,可接纳提蔓要领或每666.7平方米用0.2千克磷酸二钾对水50千克,叶面喷施2-3遍,促使薯块膨大和地上部稳长。如果爆发了徒长,秧蔓深达40厘米以上,则可以使用打群顶或用75-150克多效唑对水40-70千克叶面喷洒1-2次的步伐加以控制。 在滋生原原种时,要始终贯串避免病毒再侵染的意识。在网棚内要种植一些指示植物,每1-2个星期喷洒1次防治蚜虫的药剂。防治蚜虫的步伐有:1.5%乐果粉剂,按每亩1.5-2.5千克用量喷粉;49%乐果乳油1000-2000倍液,每亩50千克;50%敌敌畏1 500倍,每亩50千克;50%抗蚜威可湿性粉剂4000倍液,每亩50千克;20%杀灭菌酯或2.5%溴氰菌酯20毫升对水50千克喷雾;50%久效磷乳油2000-3000倍,每亩50千克。防蚜虫时更好多种药剂轮换使用,以免蚜虫爆发抗药性,达不到防治效果。 原原种收获时要逐株视察是否有病毒症状,一旦发明病株要坚决放弃,以确保原原种质量。如果网棚内所种植的指示植物体现病毒症状,整个棚内所滋生的种薯应降级使用。 七、原种繁育 用原原种苗(即原原种种薯育出的薯苗)在500米以上空间隔离条件下生产的薯块为原种。原种的滋生必须用薯苗为原原种苗:必须具有500米内无普通带毒甘薯种植的空间隔离条件;必须所用田块至少3年以上没种过普通带毒甘且为无病田。一般来讲,原原种的数量比较少,并且价格比较贵。繁育原种时更好尽早育苗,以苗繁苗,以扩大滋生面积,降低生产本钱。原原种苗快繁的要领有许多种,但以加温育苗法、采苗圃育苗法和单、双叶节滋生法更为常用。 ①加温育苗法,又称多级育苗法。在冬季或早春(2月上旬)利用火炕、电热温床、双层塑料薄膜笼罩温床或加温塑料大棚等提早排种,增强治理,增进薯苗早发快长。将原原种种薯消毒处理后排入苗床,排种时注意薯块顶端向上,薯面处于同一平面,种薯薯块平放。撤好串缝土、浇足床水后覆土盖塑料薄膜。在育苗的头一周内,温床温度更幸亏37摄氏度左右,以后逐渐降至30-32摄氏度。千万注意:如果排种到萌芽之间土壤温度低于10摄氏度,即便时间只连续1天,也会造成冻害,导致薯块腐败,影响出苗。出苗后应注意实时揭膜,制止烧苗。当薯苗长至12-18厘米、5-7片叶时剪苗,栽到另外的火炕或温床内成苗,再把先后两级苗床的苗剪栽到笼罩薄膜的冷床或大棚里继续滋生。待4月份气温上升至10摄氏度以上后再剪栽到采苗圃里育苗。 ②采苗圃育苗法。"向阳沟"采苗圃:栽种行距40厘米,株距10厘米,定植密度为666.7平方米16000-20000株。采苗周工具向开沟,薯苗紧贴沟的北面栽种,苗尖不凌驾垄背。这种要领背风向阳温度高,有利于发根长苗。小垄密植采苗圃:垄距50厘米,株距10厘米,定植密度13000株/666.7平方米。平畦采苗圃:做成1米宽小畦,浇足底墒,盖好地膜。按15厘米X15厘米株行距插苗。定植密度666.7平方米30 000株左右。为增进薯苗生长,可以分次追施氮肥,适当浇水。但采苗前几天应停止浇水,增进薯苗健壮生长,提高栽苗成活率。 ③单、双叶节滋生法。把7-8个节的薯苗剪短成1叶1节或2叶2节的短苗栽种到采苗圃里,长成5-7片叶的成苗时栽到原种滋生田里。若用单叶节滋生,每节上端要留短一些(不凌驾0.5厘米),下端留长些。更好上午剪苗下栽苗,栽后浇足窝水,第二天早晨再浇1次,盖上一层土。滋生期间应增强田间治理,治理要细致,肥水应实时,以便促使幼芽早出土。除接纳500米以内无普通带毒甘薯种植的空间隔离步伐避免蚜虫传毒再侵染外,原种滋生的其他生产条件和情况与普通甘薯生产基内幕同。因此,原种滋生田的栽培治理同普通甘薯基本一样。但滋生原种时栽插期不易过早,更幸亏6月下旬以后栽种。另外,脱毒甘薯茎叶生长比较旺盛,要注意控水控肥,避免旺长。原种滋生时要密切注意避免病毒再侵染。滋生田周围500米内不可有普通带毒甘薯种植,所用田块必须3年以上未种过普通带毒甘薯,且无茎线虫病、根腐病、黑斑病等。要在滋生田内种植一些指示植物,每15天按期喷洒防蚜虫药剂。收获前要视察病毒发病情况,实时拔去病株。收获时严把质量关,不切合质量要求的薯块坚决不入窖。 原种和良种的繁育需要有500米的空间隔离带(即500米内无带毒薯种植)和无病田块,一般情况下,春季(4月上旬)引种1 000棵高级脱毒试管苗种采苗圃,到夏季(6月下旬)可利用防虫网棚滋生666.7平方米原原种,收获原原种种薯1000-1500千克;第二年早春用原原种种薯育苗、速繁,在隔离条件下能滋生100*666.7平方米原种,收获原种种薯100-200吨;第三年可滋生5000*666.7平方米良种;第四年可以供应105*666.7平方米以上大田生产用薯种。各地可以参考这一比例,再凭据外地甘薯育苗与生产的技术水平加以适当调解,以满足外地生产对脱毒甘薯种薯的需要。 在脱毒甘薯的扩繁历程特别要注意避免病毒再侵染。具体步伐有,加盖40目防虫棚、500米以上空间隔离、按期喷洒杀蚜虫药剂等。另外,繁育原原种和原种更幸亏3年以上未种过甘薯的生茬地,切匆在病(根腐病、线虫病等)生产种薯。
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